The use of polymerase chain reaction for early diagnosis of tuberculosis in Mycobacterium tuberculosis culture

Early diagnosis plays a vital role in controlling tuberculosis. The conventional methodology is slow, with results taking several weeks, in addition to having low sensitivity, especially in clinical paucibacillary samples. The objective of this study was to evaluate the use of polymerase chain reaction (PCR) on solid medium culture for a rapid diagnosis of tuberculosis, mainly in cases of negative sputum smears. Forty sputum samples were collected from inpatients with tuberculosis treated for less than 2 days. Bacilloscopy, PCR for sputum, culture on Lõwestein-Jensen (LJ) solid medium, and daily PCR from culture were performed on each sample. DNA extracted from the BCG vaccine, which contains attenuated bacillus Calmette-Guérin, was used as the positive control. Smear microscopy showed 68.6 percent sensitivity, 80 percent specificity, 96 percent positive predictive value, and 26.7 percent negative predictive value, with culture on LJ medium as the gold standard. Culture at day 28 showed 74.3 percent sensitivity and 100 percent specificity. PCR of DNA extracted from sputum amplified a 1027-bp fragment of the 16s RNA gene, showing 22.9 percent sensitivity and 60 percent specificity. PCR performed with DNA extracted from daily culture showed that, from the 17th to the 40th day, the sensitivity (85.7 percent) and specificity (60 percent) were constant. We conclude that a 17-day culture is a good choice for rapid diagnosis and to interfere with the transmission chain of tuberculosis.

A broncofibroscopia no diagnóstico etiológico de afecçöes pulmonares em pacientes com síndrome da imunodeficiência adquirida / Bronchofibroscopy in the etiologic diagnosis of lung diseases in patients with acquired immunodeficiency syndrome

OBJETIVO: Avaliar o papel da broncofibroscopia no diagnóstico etiológico de pneumopatias em pacientes positivos ao vírus da imunodeficência humana. MÉTODOS: O presente estudo analisa um grupo de 49 pacientes com diagnóstico de síndrome da imunodeficiência adquirida, admitidos no Hospital Nereu Ramos - Florianópolis -SC. Foram selecionados pacientes sintomáticos respiratórios com lesão simples ao exame radiográfico do tórax, sem diagnóstico etiológico confirmado por exame de escarro. Tais pacientes foram submetidos à broncofibroscopia com realização de lavado broncoalveolar, escovado brônquico e biópsia pulmonar transbrônquica. As amostras foram analisados com bacterioscopia pelo Gram, pesquisa de BAAR, citomegalovírus, P. carinii e outros fungos. RESULTADOS: A broncofibroscopia foi efetiva na realização do diagnóstico etiológico em 71,43 por cento dos casos. A biópsia pulmonar transbrônquica foi a técnica com maior positividade, firmando o diagnóstico em 59,18 por cento dos casos. A técnica com menor positividade foi o escovado brônquico, com diagnóstico em 4,08 por cento dos casos. O agente etiológico mais freqüente foi o P. carinii (42,8 por cento ), seguido pelo M. tuberculosis (22,86 por cento ). Nenhuma complicação foi observada nos procedimentos realizados. CONCLUSÃO: Concluímos no presente estudo que neste grupo de pacientes a broncofibroscopia foi um procedimento seguro e efetivo para o diagnóstico etiológico de afecções pulmonares.